|
|
Analýza spolehlivosti měření látek pomocí biosenzorů - návrh robustní metody stanovení limitu detekce
Láznička, Jan ; Brno, Karel Lacina, MU (oponent) ; Grosmanová, Zuzana (vedoucí práce)
Limit detekce metody je ovlivněn přístrojem (elektronika, šumy), vyhodnocením, softwarem (nepřesnost časování, zaokrouhlovací chyby, chyby stanovení parametrů numerickými metodami z naměřených veličin) a vlastní chemickou reakcí (chyby ředění, návrh reakční směsi, chemické interferenty, teplota, přesnost pipetování). V této práci byla navržena metoda určení detekčního limitu při stanovení inhibitorů acetylcholin esterázy pomocí biosenzorového analyzátoru toxicity (BTA). Přístroj byl vyvinut společností BVT Technologies, a.s. v roce 2004. Byla provedena kalibrace výstupního signálu pro potřeby přesného měření limitu detekce přístroje BTA. V současnosti je přístroj schopen odhalit pouze přítomnost toxinů, nikoliv jejich koncentraci. V neposlední řadě jsou v této práci shrnuty všechny nalezené chyby softwaru BTA, které jsou průběžně eliminovány.
|
|
|
Amaryllidaceae alkaloids of montanine type and their derivatives as potential drugs.
Maafi, Negar ; Cahlíková, Lucie (vedoucí práce) ; Šmejkal, Karel (oponent) ; Havlík, Jaroslav (oponent)
Karlova Univerzita v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakognózie a farmaceutické botaniky Kandidát: Negar Maafi Školitel: Prof. Ing. Lucie Cahlíková, PhD. Název disertační práce: Amaryllidaceae alkaloidy montaninového typu a jejich deriváty jako potenciální léčiva. Na základě znalostí o biologické aktivitě alkaloidů montaninového typu Amaryllidaceae byly tyto alkaloidy vybrány pro přípravu jejich polosyntetických derivátů za účelem studia vztahu struktura vs. aktivita. Deriváty alkaloidů montaninového typu byly připraveny za využití haemanthaminu a montaninu jako výchozích látek. Montaninový alkaloid 3-O-methylpankracin byl připraven za využití intramolekulárního přesmyku z haemanthaminu. Montanin byl pro přípravu polosyntetických derivátů izolován z cibulí Hippeastrum x hybridum cv. Ferrari. Celkem bylo připraveno více než 80 alifatických a aromatických derivátů montaninu a 3-O-methylpankracinu. Všechny sloučeniny byly identifikovány za využití 1D- a 2D-NMR, MS, HRMS apod. Připravené deriváty byly screeningově testovány na celou řadu biologických aktivit (např. inhibiční potenciál vůči hAChE/hBuChE, antimykobakteriální, antibakteriální a antifugální aktivita, cytotoxicita a další). V rámci hAChE/hBuChE studie zajímavou selektivní hAChE inhibiční aktivitou disponoval derivát...
|
|
|
Alkaloids from Narcissus pseudonarcissus L. cv. Dutch Master and their cholinesterase and prolyl oligopeptidase inhibitory activity.
Farkašovský, Marek ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Siatka, Tomáš (oponent)
Farkašovský Marek: Alkaloidy Narcissus pseudonarcissus L. cv. Dutch Master a ich cholínesterázová a prolyloligopeptidázová inhibičná aktivita. Rigorózna práca 2017, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutickej botaniky a ekológie. Náplňou tejto práce bola izolácia obsahových látok z frakcie ND 3 - 5/2, získanej stĺpcovou chromatografiou alkaloidného extraktu z Narcissus pseudonarcissus L. cv. Dutch Master. Príprava extraktu a následná stĺpcová chromatografia bola prevedená Mgr. Danielou Hulcovou v rámci jej doktorského štúdia. Pomocou preparatívnej TLC sa z tejto podfrakcie podarilo izolovať dva alkaloidy, ktorých štruktúra bola určená na základe optickej otáčavosti, MS (EI, ESI), 1H NMR a 13C NMR analýz. Výsledky boli porovnané s dostupnou literatúrou. Prvým izolovaným alkaloidom bol O-acetylpluviin, ktorý patrí do skupiny lykorínových alkaloidov. Inhibičná schopnosť vyjadrená v IC50 bola v porovnaní so štandardmi (galantamín, huperzín A, fyzostigmín, berberín a Z-pro-prolinal) nevýznamná. IC50 AChE: 684 ± 54 µM, IC50 BuChE: 603 ± 49 µM, IC50 POP ˃1000 µM. Na základe výsledkov môžeme tvrdiť, že z hľadiska inhibície cholínesteráz a POP sa jedná o neperspektívnu látku. Druhým izolovaným alkaloidom bola zatiaľ nepopísaná látka so systematickým názvom...
|
|
|
Sledování kinetiky inhibitorů acetylcholinesterasy in vitro
Janská, Kateřina ; Herink, Josef (vedoucí práce) ; Hrdina, Radomír (oponent)
Kateřina Janská Sledování kinetiky inhibitorů acetylcholinesteras in vitro Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Farmacie Katedra biologických a lékařských věd Vedoucí práce: Doc. MUDr. Josef Herink, DrSc. Konzultant: PharmDr. Vendula Šepsová Cílem této práce bylo stanovit typ inhibice nově syntetizovaných AChEI a zjistit, jestli změna struktury AChEI ovlivňuje typ inhibice. Celkem bylo testováno 12 látek, 7 derivátů takrinu a 5 7-metoxytakrin-donepezilových derivátů. Inhibiční potenciál testovaných látek byl stanoven in vitro na lidské rekombinantní AChE. Měření bylo provedeno na spektrofotometru, Ellmanovou metodou. Byl stanoven nekompetitivní typ inhibice u látek EN 1-5, PC-25 a PC-33, smíšený typ inhibice u látek PC-48 a PC-49, akompetitivní typ inhibice u látek EN-6, EN-7 a kompetitivní typ inhibice u látky PC-37. Dle hodnot Ki bylo zjištěno, že největší inhibiční potenciál mají látky EN-7 a PC-37. Na základě KM byly určeny látky s největší afinitou k AChE, jimiž jsou PC-37 a PC-48. Poloha substituentů u PC látek a délka alkylačního řetězce u EN látek také ovlivňovala typ inhibice. Perspektivní látky EN-7 a PC-37, které prokazovaly největší potenciál inhibovat AChE a látky PC- 48 a PC-49, které jsou schopné se navázat do aktivního i periferního...
|
|
|
Alkaloids from Narcissus pseudonarcissus L. cv. Dutch Master and their cholinesterase and prolyl oligopeptidase inhibitory activity.
Farkašovský, Marek ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Siatka, Tomáš (oponent)
Farkašovský Marek: Alkaloidy Narcissus pseudonarcissus L. cv. Dutch Master a ich cholínesterázová a prolyloligopeptidázová inhibičná aktivita. Rigorózna práca 2017, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutickej botaniky a ekológie. Náplňou tejto práce bola izolácia obsahových látok z frakcie ND 3 - 5/2, získanej stĺpcovou chromatografiou alkaloidného extraktu z Narcissus pseudonarcissus L. cv. Dutch Master. Príprava extraktu a následná stĺpcová chromatografia bola prevedená Mgr. Danielou Hulcovou v rámci jej doktorského štúdia. Pomocou preparatívnej TLC sa z tejto podfrakcie podarilo izolovať dva alkaloidy, ktorých štruktúra bola určená na základe optickej otáčavosti, MS (EI, ESI), 1H NMR a 13C NMR analýz. Výsledky boli porovnané s dostupnou literatúrou. Prvým izolovaným alkaloidom bol O-acetylpluviin, ktorý patrí do skupiny lykorínových alkaloidov. Inhibičná schopnosť vyjadrená v IC50 bola v porovnaní so štandardmi (galantamín, huperzín A, fyzostigmín, berberín a Z-pro-prolinal) nevýznamná. IC50 AChE: 684 ± 54 µM, IC50 BuChE: 603 ± 49 µM, IC50 POP ˃1000 µM. Na základe výsledkov môžeme tvrdiť, že z hľadiska inhibície cholínesteráz a POP sa jedná o neperspektívnu látku. Druhým izolovaným alkaloidom bola zatiaľ nepopísaná látka so systematickým názvom...
|
|
| |
|
|
Sledování kinetiky inhibitorů acetylcholinesterasy in vitro
Janská, Kateřina ; Herink, Josef (vedoucí práce) ; Hrdina, Radomír (oponent)
Kateřina Janská Sledování kinetiky inhibitorů acetylcholinesteras in vitro Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Farmacie Katedra biologických a lékařských věd Vedoucí práce: Doc. MUDr. Josef Herink, DrSc. Konzultant: PharmDr. Vendula Šepsová Cílem této práce bylo stanovit typ inhibice nově syntetizovaných AChEI a zjistit, jestli změna struktury AChEI ovlivňuje typ inhibice. Celkem bylo testováno 12 látek, 7 derivátů takrinu a 5 7-metoxytakrin-donepezilových derivátů. Inhibiční potenciál testovaných látek byl stanoven in vitro na lidské rekombinantní AChE. Měření bylo provedeno na spektrofotometru, Ellmanovou metodou. Byl stanoven nekompetitivní typ inhibice u látek EN 1-5, PC-25 a PC-33, smíšený typ inhibice u látek PC-48 a PC-49, akompetitivní typ inhibice u látek EN-6, EN-7 a kompetitivní typ inhibice u látky PC-37. Dle hodnot Ki bylo zjištěno, že největší inhibiční potenciál mají látky EN-7 a PC-37. Na základě KM byly určeny látky s největší afinitou k AChE, jimiž jsou PC-37 a PC-48. Poloha substituentů u PC látek a délka alkylačního řetězce u EN látek také ovlivňovala typ inhibice. Perspektivní látky EN-7 a PC-37, které prokazovaly největší potenciál inhibovat AChE a látky PC- 48 a PC-49, které jsou schopné se navázat do aktivního i periferního...
|
|
|
Neurotropní a antioxidační aktivita vybraných druhů jednoděložných alkaloidních rostlin. VIII.
Breiterová, Kateřina ; Cahlíková, Lucie (vedoucí práce) ; Ločárek, Miroslav (oponent)
Autor: Kateřina Breiterová Název: Neurotropní a antioxidační aktivita vybraných druhů jednoděložných alkaloidních rostlin. VIII. Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie 2015, 101 s. Více než 50 % všech případů demence je způsobeno Alzheimerovou chorobou (AD). Jedná se o progresivní neurodegenerativní onemocnění působící postupnou ztrátu paměti, poruchy orientace i chování, jež zasahují do pacientova sociálního i pracovního života. AD je charakterictická ztrátou neuronů v určitých oblastech mozku - na příklad v hipokampu či kůře. Etiopatogeneze vzniku AD není ještě zcela známa, proto je léčba pouze symptomatická. Důležitou roli hraje vznik extracelulárních plaků proteinu β amyloidu (Aβ) okolo neuritů, což vede k jejich degeneraci a následné buněčné smrti. Aβ se podporuje vznik volných kyslíkových radikálů, což vede ke smrti neuronů, stejně jako intracelulárně vznikající uzlíky τ proteinu. Dalším z problémů je nerovnováha glutamátergního systému, jehož fyziologická funkce je nezbytná pro správnou tvorbu paměti. U pacientů s AD dochází k přílišné aktivaci tohoto systému, což vede ke vzniku šumů mezi neurony a ztížení přenosu nervového vzruchu, excitotoxicitě a apoptóze neuronů. U pacientů trpících AD je také snížena...
|
|
|
Analýza spolehlivosti měření látek pomocí biosenzorů - návrh robustní metody stanovení limitu detekce
Láznička, Jan ; Brno, Karel Lacina, MU (oponent) ; Grosmanová, Zuzana (vedoucí práce)
Limit detekce metody je ovlivněn přístrojem (elektronika, šumy), vyhodnocením, softwarem (nepřesnost časování, zaokrouhlovací chyby, chyby stanovení parametrů numerickými metodami z naměřených veličin) a vlastní chemickou reakcí (chyby ředění, návrh reakční směsi, chemické interferenty, teplota, přesnost pipetování). V této práci byla navržena metoda určení detekčního limitu při stanovení inhibitorů acetylcholin esterázy pomocí biosenzorového analyzátoru toxicity (BTA). Přístroj byl vyvinut společností BVT Technologies, a.s. v roce 2004. Byla provedena kalibrace výstupního signálu pro potřeby přesného měření limitu detekce přístroje BTA. V současnosti je přístroj schopen odhalit pouze přítomnost toxinů, nikoliv jejich koncentraci. V neposlední řadě jsou v této práci shrnuty všechny nalezené chyby softwaru BTA, které jsou průběžně eliminovány.
|
|
| |
host ::
RSS.